联系我们
多肽固相合成法是多肽合成有机化学的一个重大的提升，它的最大的优点是不必纯化中间物质，合成过程能够连续进行，进而为多肽合成的自动化奠定了基础，目前全自动多肽的合成，基本上都是固相合成，那么多肽合成原理是什么，又有什么步骤呢？今天小编在下面 给大家做详细的解答。
多肽合成的原理：
首先将目的肽的第一个氨基酸的羧基以共价键形式与固相载体（树脂）连接，再以该氨基酸的氨基组份为起点，脱去氨基保护基，和第二个氨基酸的活化羧基发生酰化反应，接长肽链。多次重复（缩合→洗涤→去保护→中和及洗涤→下一轮缩合）操作方法，达到所需要合成的肽链长度，然后再把肽链从树脂上裂解出来，通过纯化等操作，即得所需要的多肽。其中α-氨基用BOC（叔丁氧羰基）保护的称之为BOC固相合成法，α-氨基用FMOC（9-芴甲氧羰基）保护的称之为FMOC固相合成法。
多肽合成的步骤：
A，树脂选择及氨基酸的固定
用作多肽合成的高分子的载体主要分为3类：交联聚乙烯；聚酰胺：聚乙烯一乙二醇脂类环氧树脂。氨基酸的固定主要通过保护的氨基酸的羧基同树脂反应基团之间产生共价键来实现。
B，氨基、羧基、侧链的保护及脱除
能够成功合成具备特定氨基酸顺序的活性多肽，需要对暂时不参与形成酰胺键的氨基和羧基对其进行保护，并且对氨基酸侧链上的极性基团也需要保护，反应完成之后然后将保护基团除去，近些年，FMOC合成法得到广泛应用。羧基一般用形成酯基的方式进行保护。甲酯和乙酯是逐步生成中保护羧基比较常用的方式。
C，成肽反应
固相中的成肽反应一般都是把两个相应的氨基被保护的及羧基被保护的氨基酸放到溶液内并不形成肽键，要形成酰胺键，经常使用的手段是将羧基活化，变为混合酸酐、活泼酯、酰氯或用强的缩合剂（如碳二亚氨）形成对称酸酐等方法来形成酰胺键。
D，裂解及合成肽链的纯化
BOC法用TFA+HF裂解和脱侧链保护基，FMOC法直接用TFA，有时候根据条件不同，其它碱、光解、氟离子和氢解等脱保护方式也被采用。合成肽链更进一步精制、分离与纯化一般采用高效液相色谱、亲和层析、毛细管电泳等。
以上就是小编给大家介绍的多肽合成的原理和步骤这块的相关知识哦，强耀生物专注于多肽合成、蛋白表达、抗体制备等，从事于多肽行业多年，产品品质一流，欢迎广大客户前来咨询。
返回